犬小孢子如何检测?
这个问题,我可以说非常的有经验了! 之前养了一只小孢子,因为太小一直查不到基因型,所以就想到了测DNA的方式。 首先,你要找到你买的小孢子的爸爸或者妈妈之一(当然最好的就是爸爸,因为基因型会比较稳定),然后从它那里提取DNA。
这里提一下,如果狗狗还没有做芯片,但是你已经知道它的名字和生日的话,是可以在线申请得到它的基因型的,这个网站是http://www.vetgenomics.com/cgi-bin/namechecker_en_US.cgi,选择宠物品种,输入姓名和生日期就可以了,不过只能查10个名称,如果超过10个就需要付费了(记得先备份好基因型结果哦)。 如果已经做了芯片的狗,查询芯片结果也是一样的。
这里要特别提醒的是,一定要确认你拿到的是狗狗的纯 DNA ,因为有的检测机构会在检测报告中混入一定量的人类 DNA(大约占百万分之五到十的比例)。这些人类 DNA 对一些实验动物是有影响的,例如导致小鼠不育、小鼠胚胎死胎等。对人和宠物的影响目前还不是很清楚。
一般情况,我们实验室收到的外周血总是含有一些抗凝剂的(如肝素),所以在进行 DNA 提取前要先去除其中的抗凝剂,方法很简单,加水稀释就可以了(大概每500ul血液加2.5ml水)。另外,有些实验室可能会直接给你浓缩过 DNA 的样品,这种情况下就不需要再加水了。
如果你得到的样本并不是纯 DNA ,还需要做一步 DNA 纯化才能使用。 我用的是 Omega 的 DNA Clean & Concentrator™-5 ,把混合物加到溶液 A 中,在 65℃ 下温浴 30min 后,离心分离,取上清液加至新的凝胶柱中,上样,然后收集DNA 。这样就能得到比较纯净的 DNA 了。